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蔬菜水果中的農(nóng)藥殘留檢測有快速檢測法和實(shí)驗(yàn)室儀器檢測法,快速檢測法可以快速了解蔬菜水果中的農(nóng)藥殘留情況,但準(zhǔn)確度比較差。
農(nóng)藥殘留檢測儀檢測法準(zhǔn)確度高,花費(fèi)時間短,可根據(jù)實(shí)際需要使用。
食品中農(nóng)藥殘留快速檢測方法:
1.免疫檢測技術(shù)用于農(nóng)藥殘留的免疫檢測技術(shù)有放射免疫分析(RIA)和酶免疫分析(EIA)兩種。兩種技術(shù)基本原理相同,即抗原與抗體反應(yīng)形成抗原抗體復(fù)合物。RIA技術(shù)以放射性同位素作指示劑,然后用γ射線探測儀或閃爍計(jì)數(shù)器測定γ射線或β射線的放射強(qiáng)度。而在EIA技術(shù)中,用生物酶作標(biāo)記物。酶與底物發(fā)生特異性反應(yīng),生成的產(chǎn)物與另一種物質(zhì)產(chǎn)生顏色反應(yīng)或使紫外吸光值發(fā)生改變,用分光光度計(jì)測定底物液吸光值變化推算出被測物濃度。
2.酶化學(xué)法20世紀(jì)90年代,我國學(xué)者將醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)血液中膽堿酯酶檢測原理應(yīng)用于農(nóng)藥殘留快速檢測。目前有速測卡法和酶抑制率法。酶化學(xué)法優(yōu)點(diǎn)是投資少,速度快,操作簡便。其缺點(diǎn)是定量不夠準(zhǔn)確,只能測出總量,不能檢出具體農(nóng)藥品種。因此酶化學(xué)法適用于批發(fā)市場篩選抽查,生產(chǎn)基地自查,也適用于大型儀器檢出前粗選。我國蔬菜、水果不得檢出的農(nóng)藥品種,幾乎都是高毒、高殘留的有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類殺蟲劑。因此酶化學(xué)法對快速檢測蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留,初步判斷其質(zhì)量安全狀況,防止因食用蔬菜、水果而發(fā)生農(nóng)藥急性中毒具有一定意義。2001年農(nóng)藥殘留速測卡法和酶抑制率法被制定為國家標(biāo)準(zhǔn)推薦方法。
a、速測卡法基本原理:膽堿酯酶可催化靛酚乙酸酯水解為乙酸與靛酚(呈藍(lán)色),而有機(jī)磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥可抑制膽堿酯酶的活性,使催化水解,變色過程發(fā)生改變。由此推斷蔬菜中是否含此類農(nóng)藥。
檢測:選取有代表性樣品,剪切成1cm見方碎片。取5g放入帶蓋瓶中,加入10ml緩沖液,振搖50次,靜置2min,取速測卡,白色要片沾取提取液,放置10min以上,將卡對折,用手捏3min,使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反應(yīng)。白色藥片不變色或略有藍(lán)色,均為陽性,變?yōu)樯钏{(lán)或與空白對照卡相同為陰性。
b、酶抑制率法(分光光度法)
基本原理:膽堿酯酶可使乙酰膽堿水解生成膽堿和乙酸,水解產(chǎn)物與顯色指示劑作用使溶液顯色。有機(jī)磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥可以抑制膽堿酯酶活性。如果膽堿酯酶活性被完全抑制則不能使乙酰膽堿水解,不能與顯色劑作用,溶液為無色;如果活性部分被抑制,乙酰膽堿部分,溶液顏色比空白溶液淺。用分光光度計(jì)在一定波長下測定其吸光度的變化算出酶抑制率,從而推算出農(nóng)藥殘留含量。
抑制率用式(1)表示:I=(A0-At)/A0×100%(1)
式中:I--抑制率,A0--正常值(空白值)吸光度,At--樣品溶液吸光度。
目前采用的酶有乙酰膽堿酯酶和丁酰膽堿酯酶。底物有乙酰膽堿、丁酰膽堿、氯代乙酰膽堿及硫代乙酰膽堿等,顯色劑一般采用5,5’-二硫代雙(2-硝基苯甲酸)。
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